제한효소
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제한효소 #
- 세균이 바이러스의 공격을 받으면 생산하는 효소로 침입자의 DNA를 제거하는 방어 기제
- 3,600개 이상의 제한효소가 알려져 있음, 이 중 800개 이상이 상업적으로 이용할 수 있음
- 이중나선의 DNA 서열 중 특정 염기서열을 인식하여 절단
- 제한효소가 인식하는 서열은 회문 (Palindrome) 구조를 띰 (거꾸로 읽어도 동일한 서열)
제한효소의 작용 #
제한효소가 DNA 서열을 절단하는 두 가지 방식
- Blunt end : 두 가닥의 DNA 서열을 대칭적으로 절단
- Sticky end : 두 가닥의 DNA 서열을 비대칭적으로 절단
제한효소의 명명 #
발견된 미생물의 속 (Genus)명, 종 (Species)명, 균주(strain)와 발견 순서에 따라 부여
예시) EcoRI
제한효소의 종류 #
- Type Ⅰ enzyme: 3개의 subunit으로 이루어져 있으며, 특정 염기서열을 인지한 후, 그 자리에서 조금 떨어진 부분의 비특이적인 염기서열을 절단. ATP를 필요로 함
- Type Ⅱ enzyme: 특정 염기서열을 인지한 후, 그 염기서열 안에서 절단
- Type Ⅲ enzyme: 2개의 subunit으로 이루어져 있으며, 특정 염기서열을 인지한 후, 그 자리로부터 24~26bp downstream 떨어져 있는 부위를 절단. ATP를 필요로 함
- Type IV enzyme: 변형된 DNA를 표적으로 하는 제한효소 (Methylated, Hydroxymethylated, Glucosyl-hydroxymethylayted)
- Type V enzyme: gRNA를 활용하여 비 회문 서열을 표적으로 삼는 효소, (CRISPRs의 cas9-gRNA 복합체)
제한효소의 활용 #
- 유전자 지도 작성: 제한효소가 작용하는 상대적인 위치를 확인하여 유전자 지도를 작성
- 유전자 클로닝: 특정 유전자를 Plasmid에 삽입하여 미생물 내에서 유용 물질의 대상 생산 유도
- DNA Fingerprinting: 제한효소 작용에 따른 DNA 절편 크기의 차이를 활용한 유전체 동일성 확인 방법
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