qPCR
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- Experiment
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qPCR #
qPCR(quantitative real time polymerase chain reaction) 은 Real-time polymerase chain reaction, real-time PCR (RT-PCR)라고도 불린다. 목표 DNA 분자의 증폭과 양의 측정이 동시에 이루어진다. DNA가 실시간 측정되는데, 어떤 DNA 이중나선에도 끼어들 수 있는 형광염색과 올리고뉴클레오티드로 이루어진 서열-특이적 DNA탐침이 필요하다.
qPCR 의 활용 #
RNA #
- Gene Expression Profiling Analysis
- miRNA Expression Profiling Analysis
DNA #
- SNP Genotyping & allelic discrimination
- Somatic Mutation Analysis
- Copy Number Detection/Variation Analysis
- Chromatin IP Quantification
- DNA Methylation Detection
- Pathogen Detection
- Viral Quantification
qPCR 워크플로우 #
Denaturation -> Annealing -> Extension -> Denaturation -> Annealing/Extension
qPCR 결과 분석 #
- ∆Ct = Ct (Target A ‐treated) – Ct (Ref B‐treated)
- ∆Ct = Ct (Target A‐control) – Ct (Ref B‐control)
- ∆∆ Ct = ∆ Ct (treated) – Ct (control)
- Normalized target gene expression level = 2(‐∆∆Ct)